Описание

Синонимы (rus): Биопсия, амилоид, амилоидоз, системный амилоидоз

Синонимы (eng): Biopsy, amyloid, amyloidosis, systematic amyloidosis

Биоматериал: Подкожный жир

Показатель(и): Амилоид

Метод(и): Микроскопия поляризационная

Тип контейнера и особенности преаналитики: Шприц с подкожным жиром

Системные амилоидозы являются группой заболеваний, характеризующихся отложением белков, приобретших неправильную конформацию, с последующим прогрессирующим повреждением органов. На данный момент известно около 28 различных белков, служащих возможными причинами амилоидных заболеваний от локализованного церебрального амилоидоза и нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера или Крейтцфельдта-Якоба, до системных амилоидозов, таких как AL- и AA-амилоидозы. Поражение органов может быть причинено посредством реализации двух механизмов: непосредственным физическим замещением паренхимы органов амилоидными отложениями и прямой цитотоксичностью (так, например, действуют легкие цепи иммуноглобулинов на кардиомиоциты). «Золотым стандартом» для обнаружения амилоидных отложений является биопсия. В то время как ранее наиболее значимой для постановки диагноза системного амилоидоза считалась биопсия десны или подслизистой прямой кишки, предпочтительным методом сейчас является тонкоигольная аспирация подкожного жира. Амилоид представляет собой аморфную эозинофильную субстанцию, которая при использовании красителя Конго-рот окрашивается в оранжевый цвет, а при последующей поляризационной микроскопии проявляет способность к двойному лучепреломлению и дает характерное зеленоватое свечение. При окраске аспирата подкожно-жировой клетчатки по Конго-рот возможно определение наличия амилоида у 90% пациентов с AL-амилоидозом (большая часть клинических исследований проводится среди пациентов с этим типом амилоида). Недостатком указанного места биопсии является невозможность специфического типирования отложенного белка, а следовательно уточнения диагноза, поэтому наиболее часто данный метод используется в качестве скринингового. Альтернативным методом может быть биопсия костного мозга, так как строма или кровеносные сосуды являются позитивными на амилоид у 60% пациентов (кроме того, биопсия костного мозга используется для исключения множественной миеломы при наличии моноклонального синтеза). При отрицательном результате окраски тонкоигольной аспирации подкожной жировой клетчатки второй ступенью становится исследование губной слюнной железы. В этом случае наличие амилоида обнаруживается у 50% пациентов. В случае отрицательного результата на второй ступени, но высокой вероятности диагноза применяется биопсия предположительно вовлеченного органа. Для определения типа амилоида возможно применение пробы с 5% перманганатом калия на предварительно окрашенных Конго-красным препаратах: так, при данной обработке АА-тип амилоида теряет окраску и способность к двойному преломлению в поляризующем свете, а AL-тип амилоида сохраняет эти свойства. Также для дифференциальной диагностики АА- от AL-амилоида возможно применение щелочного гуанидина. Наиболее точным методом является иммуногистохимическое исследование с применением анти-сывороток к основным типам амилоидного белка.

Когда назначается

Диагностика системного амилоидоза

Подготовка к анализу

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется забор крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.Не курить в течение 30 минут до исследования.

Интерпретация

Обнаружение амилоида, имеющего типичную окраску по Конго-рот при поляризационной микроскопии подтверждает диагноз системного амилоидоза. Зачатсую при единичном исследовании невозможно получить ясную картину, в связи с чем рекомендовано проведение многократных повторных биопсий при высокой уверенности лечащего врача в диагнозе. Оценка окраски Конго-рот в значительной мере осложняется субъективностью метода. Так, получение ложноотрицательных результатов может быть связано с преобладанием отложения амилоида во внутренних органах над подкожно-жировой клетчаткой при выборе аспирации абдоминального жира, с вариабельностью или бледностью окрашивания ткани, с малой длительностью заболевания (более массивные отложения предположительно коррелируют с большей продолжительностью заболевания), со скудным количеством ткани в мазке, неоптимальной толщиной среза при биопсии.

Список литературы

  1. Swan N, Skinner M, O'Hara CJ. Bone marrow core biopsy specimens in AL (primary) amyloidosis: A morphologic and immunohistochemical study of 100 cases. Am J Clin Pathol. 2003;120:610–616.
  2. Merlini, G., Bellotti, V. Molecular mechanisms of amyloidosis. N. Engl. J. Med. 2003 349, 583–596
  3. Westermark, P., Benson, M. D., Buxbaum, J. N., et al Amyloid: toward terminology clarification—report from the Nomenclature Committee of the International Society of Amyloidosis. Amyloid2005 12, 1–4
  4. Obici, L., Perfetti, V., Palladini, G., et al Clinical aspects of systemic amyloid diseases. Biochim. Biophys. Acta2005 1753, 11–22
  5. Falk, R. H., Comenzo, R. L., and Skinner, M. Medical progress—the systemic amyloidoses. N. Engl. J. Med. 1997 337, 898–909
  6. Picken, M. M. New insights into systemic amyloidosis: the importance of diagnosis of specific type. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 2007 16, 196–203
  7. Shi J, Guan J, Jiang B, et al. Amyloidogenic light chains induce cardiomyocyte contractile dysfunction and apoptosis via a non-canonical p38alpha MAPK pathway. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010;107:4188–4193
  8. van Gameren II, Hazenberg BP, Bijzet J, et al. Diagnostic accuracy of subcutaneous abdominal fat tissue aspiration for detecting systemic amyloidosis and its utility in clinical practice. Arthritis Rheum. 2006;54:2015–2021
  9. Merlini G, Seldin DC, Gertz MA. Amyloidosis: pathogenesis and new therapeutic options. J Clin Oncol. 2011;29(14):1924–1933. doi:10.1200/JCO.2010.32.2271