Лаборатория медицинской диагностики, лицензия ЛО-78-01-006578 от 20.02.2016

Исследование антител при целиакии

Лабораторные тесты
Код МЦ ЛМД Наименование анализа Cтоимость
02-07-069 Ат. к к рек. чел. трансглутаминазе 2 (ТТГ2) класса IgA 850 руб.
02-05-068 Типирование HLA DQ2/DQ8 при целиакии (слюна) 3 300 руб.
02-07-089 Антитела к эндомизию класса IgA (АЭА) 850 руб.
02-07-075 Ат. к дезамидированным пептидам глиадина IgG (ААГ) 800 руб.
Комбинации тестов
Код МЦ ЛМД Наименование анализа Cтоимость
02-07-072 Скрининг целиакии (ААГ IgG и ТТГ2 IgA) 1 400 руб.
02-07-071 Серологическая диагностика целиакии (АЭА и ТТГ2 IgA/IgG) 2 050 руб.
02-07-073 Полная серология целиакии (АЭА и ТТГ и АРА и АГА IgA/G) 3 550 руб.

Лабораторные тесты для диагностики целиакии (в порядке клинической значимости):

  • 02-07-069  Антитела  к крекомбинантной человеческой трансглутаминазе 2 (TG2) класса IgA (ТТГ IgA) - тест второго поколения по крови из пальца
  • 02-01-068 Типирование HLADQ2/DQ8 при целиакии по пробе слюны
  • 02-07-089 Антитела к эндомизию класса IgA (АЭА) - непрямая иммунофлюоресценция
  • 02-07-075 Антитела к дезаминированным пептидам глиадина ДПГ класса IgG (ААГ IgG)
  • 02-07-090 Антитела  к рекомбинантной человеческой тканевой  трансглутаминазе 2 класса IgG (ТТГ IgG)- тест второго поколения
  • 02-07-091 Антитела к дезаминированным пептидам глиадина класса IgA (ААГ IgA)

Комбинации тестов для диагностики целиакии

  • 02-07-072 Скрининг целиакии(ААГ IgG и ТТГ IgA)
  • 02-07-071 Серологическая диагностика целиакии (АЭА и ТТГ IgA/IgG)
  • 02-07-073 Полная серология целиакии (АЭА и ТТГ и АРА и АГА IgA)

Антитела и критерии диагностики целиакии

Появление новых тест-систем второго поколения для определения антител при целиакии обеспечило надежность серологической диагностики. До сих пор ряд лабораторий использует уже устаревшие тесты для определения антител к глиадину (альфа-глиадину) и антител к тканевой трансглутаминазе. Тесты первого поколения очень неспецифичны, что приводит к высокой частоте ложно-положительных анлизов, и как следствие, к гипердиагностике целиакии. Тесты первого поколения не рекомендованы для практической диагностики.

Антитела к глиадину в течении длительного времени (с 50-х годов прошлого века) оставались основным методом иммунологической диагностики целиакии. Строго говоря, глиадин не является аутоантигеном, однако иммунная реакция против глиадина запускает каскад иммунных реакций, в результате которого развивается аутоиммунное заболевание и появляются аутоантитела. Изучение молекулярной структуры белков в составе глютена привело к идентификации общей для них линейной иммунодоминантной аминокислотной последовательности QPEQPFP. Последний остаток глютамина в этой структуре является мишенью для фермента тканевой трансглутаминазы, под действием которой он превращается в глутамат. Изменение заряда молекулы приводит к лучшему связыванию ее с HLADQ2/8 и стимуляции иммунного ответа.

Длительное время для определения антител к глиадину использовали ИФА метод (тесты первого поколения). Антитела к очищенному альфа-глиадину пшеницы представляют собой сравнительно неспецифические тесты. В целях лабораторной диагностики целиакии используется определение антител к глиадину классов IgA и IgG. Антиглиадиновые антитела класса IgG чувствительны, но очень неспецифичны, и их можно рассматривать как показатель, отражающий воспаление в желудочно-кишечном тракте. Антитела класса IgA отмечаются у 30-40% больных с целиакией.

В настоящее время для практической дигностики рекомендованы только тесты для выявления антител к дезаминированным пептидам (DGP-пептидам). Эти тесты основаны на выявлении антител к иммунодоминантным аминокислотным последовательностям глиадина. Они несколько уступают по чувствительности и специфичности выявлению антител к тканевой трансглутаминазе IgA и антителам к эндомизию.

Первым описанием аутоантител к эндомизию (АЭА) при целиакии относится к 1983 году, когда они были случайно выявлены на пищеводе обезьяны при обследовании больных с герпетиформным дерматитом (Chorzelsky et al.). С этого момента выявление антиэндомизиальных антител стало основным методом серологической диагностики целиакии, в значительной мере заменив менее клинически надежные антитела к глиадину.

В 1997 году Dieterich путем сорбции с очищенным белком, полученным из клеточных линий, показал, что основным антигеном АЭА является тканевая трансглутаминаза. Тканевая трансглутаминаза (ТТГ) представляет собой распространенный кальций-связывающий фермент. Его основной функцией является образование перекрестных связей между белками за счет реакции между глутамином в одном белке и лизином в другом. Существует 5 изоформ этого фермента, которые отличаются по тканевой локализации. В желудке преимущественно экспрессируется 2 тип ТТГ (TG2). Мишенью антител при герпетиформном дерматите, который тесно связан с целиакией, является 3 тип ТТГ, который экспрессируется в коже. В норме активность этого фермента максимальна в клетках базального слоя кишечного эпителия, а также в подслизистом слое. У больных целиакией отмечается повышенная экспрессия ТТГ во всех слоях слизистой кишечника. Альфа-глиадин на 60% состоит из аминокислоты глютамина, который подвергается дезаминированию под действием фермента тканевой трансглутаминазы. Дезаминирование глиадина приводит к образованию неоэпитопов, содержащих отрицательно заряженную аминокислоту глютамат, которые имеют высокое сродство к HLA-DQ2 и DQ8, носительство которых предрасполагает к развитию целиакии. Необходимо отметить, что генотип HLA-DQ2 отмечается у 25-30% европейцев, однако далеко не у всех у них развивается целиакия.

Тканевая трансглутаминаза дезаминирует также ряд белков соединительной ткани в составе эндомизиальных и ретикулиновых волокон. Таким образом, иммунный ответ на экзогенный антиген ведет к появлению антител к альфа-глиадину, а также аутоантител, направленных против аутоантигенов эндомизия, ретикулина и тканевую трансглутаминазу.

В иммуноферментных тестах первого поколения для определения антител к тканевой  ТТГ использовались антигены животных, прежде всего очищенный фермент из печени морской свинки. Однако низкий уровень очистки белка, а также наличие видоспецифичных эпитопов снижает специфичность теста. Такие тест системы приводят к ошибочным диагнозам целиакии.

Второе поколение ИФА было основано на рекомбинантной человеческой ТТГ 2 типа. За счет прекрасных аналитических параметров эти ИФА тесты являются наилучшим методом для первичного обследования при подозрении на целиакию. Изучение антигенной структуры молекулы ТТГ показало, что основной эпитоп антител при целиакии, является конформационным и образован ядром молекулы фермента. Аутоантитела к ТТГ, характерные для целиакии, подавляют активность фермента. В то же время, антитела к ТТГ, встречающиеся у больных с аутоиммунным гепатитом, циррозом, вирусными инфекциями, направлены к внешним доменам молекулы ТТГ. Этим может объясняться меньшая специфичность антител к ТТГ по сравнению с выявлением АЭА.

При сравнении антител к эндомизию класса IgA и антител к ТТГ антител показано, что АЭА являются значительно более специфичными, однако несколько менее чувствительными. Это позволяет рекомендовать выявление антител к ТТГ в качестве скрининга аутоантител при целиакии, однако при положительном результате скринингового теста рекомендовано определение антител к эндомизию.

Для лабораторной диагностики целиакии используется выявление антител к ТТГ классов IgA и IgG. Наиболее специфичен тест для выявления антител к ТТГ класса IgA, которые отмечаются у 99% больных с дебютом целиакии. Аутоантитела класса IgA могут быть обнаружены как в крови, а также других биологических жидкостях, в том числе слюне и желчи. Выявление аутоантител класса IgG несколько менее специфично, так как они могут отмечаться при других воспалительных заболеваниях ЖКТ, однако они используются для диагностики целиакии у лиц с селективных дефицитом IgA.

В настоящее время для практической дигностики рекомендованы только тесты для выявления антител к дезаминированным пептидам (DGP-пептидам). Эти тесты основаны на выявлении антител к иммунодоминантным аминокислотным последовательностям глиадина. Они несколько уступают по чувствительности и специфичности выявлению антител к тканевой трансглутаминазе IgA и антителам к эндомизию.

Выявление антител с помощью тестов второго поколения к диагностике целиакии показало, что антитела обладают очень хорошими клинико-диагностическими параметрами (т.е. встречаются исключительно на фоне целиакии и не встречаются при других аутоиммунных заболеваниях ЖКТ).  Более того, выявление антител к тканевой трансглутаминазе в титре в 10 раз превосходящем верхнюю границу нормы позволяет с вероятностью 100% предсказать наличие изменений в стенке кишки. Подтверждение высоких титров ТТГ класса IgAс помощью выявления антител к эндомизию обеспечивает практически абсолютную уверенность в диагнозе.

Среди больных целиакией не получавших безглютеновую диету положительными по антителам к ТТГ IgAи антителам к ДПГ IgGявляются практически все пациенты. В таком случае обнаружение антител к эндомизию и генотипирование HLADQ2-8 позволяет подтвердить диагноз у 50-70% первичных пациентов, не прибегая к болезненной процедуре эндоскопии и биопсии слизистой тонкого кишечника.

Критерии диагностики целиакии ESPGHAN 2012

Рейтинг: 
Средняя: 5 (1 оценка)